国外访问学者做实验小插曲

　　我是硕博连读生， 在同一个老板的实验室以访问学者身份待了快3个年头了。回想走过的日子，真的有种不知从何说起的味道。从刚进实验室做师妹到现在为人师姐，从刚进实验室的新鲜感到现在的对实验的自信心，其中的酸甜苦辣，让人回味无穷。让人觉得有太多的故事要倾诉。这里，我想与大家分享一下我的一段实验小插曲。

　　我的课题是研究同种T淋巴细胞。其中，涉及四聚体的制备技术。制备四聚体的过程很烦琐。首先要构建好原核表达的质粒，获得重链和轻链的目的蛋白，把目的蛋白在体外用稀释折叠复性大的方法折叠成我们所需的蛋白复合物单体分子。通过生物素和亲和素的结合原理把此单体分子结合成个四聚体分子。同此四聚体分子来研究同种T淋巴细胞。

　　我的实验要用十种不同的四聚体分子来研究同种T淋巴细胞。制备一种四聚体，工作量已经是很大。何况十种?我有点急于求成的心情。所以我同时进行开展十种不同的四聚体分子的制备。在这过程中，有浓缩的一步。原来我们采用的PEG20000浓缩法。虽然有PEG20000干扰的副作用。但是还是可以获得所需蛋白。在我开展十种不同的四聚体分子的制备时，实验室引进了一个超滤浓缩的仪器。我想这比PEG20000浓缩法要好，除浓缩外，还可以纯化蛋白。所以我当时兴致很高，把十种分子同时用超滤浓缩法浓缩了。可是，当电泳检测时，我的蛋白全没有了。我当时不知所措。我两个月的工作得从头开始。什么原因导致蛋白没有了?我现在没有找到。分析了几种原因。也许仪器出了问题，也许选的滤膜分子量大了，太多的也许。但是有一点是我太心急，才这样惨!如果当时我开始先拿一种四聚体分子来超滤浓缩试验一下。结果没有这么惨。总结一下，做实验不能太急，也不能太相信理论的东西，只有实践出真知。

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